Alexandre Leme Godoy dos Santos Papel do polimorfismo genético na expressão das metaloproteases na tendinopatia primária do tendão tibial posterior Tese apresentada à Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo para obtenção do título de Doutor em Ciências Programa: Ortopedia e Traumatologia Orientador: Prof. Dr. Rames Mattar Junior São Paulo 2011 Dados Internacionais de Catalogação na Publicação (CIP) Preparada pela Biblioteca da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo reprodução autorizada pelo autor G o d o y-Santos, Alexandre Leme Papel do polimorfismo genético na expressão das metaloproteases na tendinopatia primária do tendão tibial posterior / Alexandre Leme Godoy dos Santos. -- São Paulo, 2011. Tese(doutorado)--Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Programa de Ortopedia e Traumatologia. Orientador: Rames Mattar Junior. Descritores: 1.Tendinopatia 2.Disfunção do tendão tibial posterior 3.Metaloproteases 4.Polimorfismo genético USP/FM/DBD-400/11 DEDICATÓRIA A minha irmã Maria Cristina, exemplo de dedicação à vida acadêmica. Ao meu avó Hugo de Almeida Leme, exemplo de homem, de pai e de Professor. AGRADECIMENTOS Aos pacientes que participaram desse estudo e contribuíram para o avanço da ciência nessa área do conhecimento médico. Ao Professor Rames Mattar Junior, por sua brilhante ajuda e pelo apoio no desenvolvimento desse projeto. Aos Professores Tarcísio Eloy Pessoa de Barros Filho, Olavo Pires de Camargo e Gilberto Luís Camanho pelas oportunidades e pelo estímulo continuo ao meu desenvolvimento acadêmico. Ao Professor Arnaldo Valdir Zumiotti por seu exemplo pessoal, pelo incentivo a minha pós-graduação e pelo convívio enriquecedor. Ao Professor Túlio Diniz Fernandes pela expressiva contribuição para minha formação pessoal e profissional. Ao Doutor Jorge dos Santos Silva, pelo apoio e estímulo constantes. Ao Doutor Marcos Hideyo Sakaki, pelas importantes oportunidades. Ao Doutor Marcos de Andrade Corsato, pela contribuição ao meu crescimento pessoal. Ao Doutor Rafael Trevisan Ortiz por seu entusiasmo e pelo exemplo de dedicação ao Instituto de Ortopedia e Traumatologia da USP. Aos meus pais Walter e Edna Maria por seu carinho, suporte e dedicação aos 5 filhos, pelo exemplo, educação e valores, que hoje pautam as nossas vidas; pela sabedoria de nos dar aquilo que precisávamos e não aquilo que queríamos. Aos meus irmãos Rafael, Walter e Fernando pelas alegrias e pelo orgulho que dão a nossa família. A minhas avós Aglaé e Angelina, mulheres elegantes, atuantes em suas profissões; avós carinhosas e atentas, que influenciaram de forma marcante a minha vida. A minha querida Flávia, por sua presença em todos os momentos. Lista de Abreviaturas CAPPESQ. Comissão de Ética para Análise de Projetos de Pesquisa COL5A1. collagen type V alpha 1 DNA. deoxyribonucleic acid EDTA. quelante ethylenediaminetetraacetic acid et. al. e outros FMUSP. Faculdade de medicina da Universidade de São Paulo GDF-5. growth differentiation factor 5 GT. guanina-timina MMPs. metaloproteases MMP-1. metaloprotease tipo 1 MMP-3. metaloprotease tipo 3 MMP-8. metaloprotease tipo 8 MMP-9. metaloprotease tipo 9 MMP-13. metaloprotease tipo 13 ON. overnight PCR. Polimerase Chain Reaction RFLP. Restriction Fragment Length Polymorphism SNPs. Single Nucleotide Polymorphisms TBE. Solução tampão Tris/Borato/EDTA TGF-β1. transforming growth factor beta TE. solução de Tris-Cl a 10 mM (pH 7,8) e 1 mM EDTA TNE. solução de 10 MM Tris pH 8, 150 MM NaCl e 2 mM EDTA TNC. tenascin C UFPR Universidade Federal do Paraná USP Universidade de São Paulo Lista de Tabelas e Quadros    Tabela 1: Critérios de não inclusão..........................................................................................21  Tabela 2: Informações sobre condições da técnica de PCR e de RFLP....................................23  Tabela 3: Média de idade e distribuição por faixa de IMC da amostra nos grupos de estudo.26 Tabela 4: Frequência dos alelos e genótipos do polimorfismo -1607 do gene da MMP-1......29 Tabela 5: Frequência dos alelos e genótipos do polimorfismo -1612 do gene da MMP-3......31 Tabela 6: Frequência dos alelos e genótipos do polimorfismo -799 do gene da MMP-8........33 Quadro 1: Estágios da insuficiência do tendão tibial posterior................................................43 Lista de Figuras    Figura 1: Genótipos da MMP-1 (-1607)......................................................................28 Figura 2: Genótipos da MMP-3 (-1612)......................................................................30 Figura 3: Genótipos da MMP-8 (-799)........................................................................32 RESUMO