RevuesuisseZool. Tome98 Fase. 1 p. 15-32 Genève, mars 1991 Redescription de Proteocephalusjarara (Fuhrmann, 1927) (Cestoda: Proteocephalidae) parasite de Bothrops alternatus (Viperidae) au Brésil par Alain deCHAMBRIER *, Maria Luciad'ALESSIO ** etFernando M. deAZEVEDO CORREA ** Avec21 figures Abstract Redescription of Proteocephalusjarara (Fuhrmann, 1927) (Cestoda: Proteocephalidae) — parasite ofBothropsalternatusDum., Bibr. & Dum., 1854, from Brazil. Specimens of Proteocephalusjarara (Fuhrmann, 1927) collected in Bothropsjararaca from Brazil and relevant types are redescribed and figured. The species shows the following morpho- anatomical characters: the gravid uterus extending from the medullato the dorsal cortex; the arrangement ofthe uterine branches in cross section fan-like; the vitelline follicles in a latero-dorsal position attached to the internal longitudinal musculature and extending into both the cortex and medulla; a characteristic circular musculature structure of the scolexsuckers. ThetypewerecollectedinBothropsalternatuswhichmaybemisidentifica- tion. We presume that the host is Bothropsjararaca. Ophiotaeniajarara Dos Santos and Tayt-Son Rolas, 1973 neeFurhmann, 1927 belongstoProteocephalussp. Ophiotaeniasp. sensu Dos Santos and Tayt-Son Rolas, 1973 refers to P. jarara (Furhmann, 1927). * Musée d'Histoire naturelle de Genève, Case postale 434, 1211 Genève 6. ** Service de Parasitologic, Institut Butantan, Caixa postal 65, 01000 Sao Paulo, Brésil. 16 ALAINDECHAMBRIER,MARIALUCIAD'ALESSIOETFERNANDOM.DEAZEVEDOCORREA INTRODUCTION Dansunlotdecestodesdeserpentsrécoltésàl'InstitutButantandeSaoPaulo, Brésil, en 1988 et 1989, nous avons trouvé, dans 58 Bothropsjararaca (Wied, 1822), 11 exem- plaires d'une espèce que nous avons identifiée commeProteocephalusjarara (Fuhrmann, 1927). La charge parasitaire est de 1 à 4 cestodes par hôte. Dos Santos et Tayt-Son Rolas (1973) avaient signalécetaxonchezBothropsjararacussu. L'examen de leurmaté- riel nous a montré qu'il ne s'agit pas de P. jarara. Afin de clarifierlestatut spécifiquedeP. jarara, nous redécrivons ici lematérieltype de Fuhrmann, en complétant nos observations, en particulier la formation de l'utérus, avec le matériel provenant de nos récoltes. Ce travail a bénéficié en partie d'un soutien de la «Fundaçào de Amparo à Pesquisa do Estado de Sào Paulo» (Proc. 90/2877-3). MATERIEL ET METHODE Les serpents sont tués par injection d'une solution de MS 222 (de Sandoz, Bale, Suisse) et immédiatement autopsiés. Le tube digestifest prélevé de l'estomac à l'anus puis fendu dans toute sa longueur. Les cestodes récoltés sont placés dans une boîte de Pétri contenant de la solution physiologique. Ils sont fixés dans une solution de formaldehyde à 4% bouillante (formaldehyde concentré, dilué 9x). Le matériel fixé est coloré soit à l'hématoxyline de Weigert (Locquin & Langeron 1978; deChambrier 1987), soit au carmin chlorhydrique de Mayer, suivi d'une différen- ciation à l'alcool éthylique acide. Les vers sont déshydratés, puis éclaircis à l'Eugénol («Clove oil») et montés au baume du Canada. Les coupes transversales de 15 |im d'épais- seur sont colorées à l'hématoxyline de Weigert/éosine et montées au baume du Canada. Les figures sont dessinées au moyen d'une chambre à dessin. LematérielestconservéauMuséumdeGenève(N° MHNG 12392et 12393)et auSer- vice de Parasitologic de l'Institut Butantan (N° 6562 et 6563). Sauf indication contraire, toutes les mesures sont données en [im. Abréviations utilisées: x=moyenne, n=nombre de mesures ou d'observations, Sd=écart-type, Cv=coefficient de variation. Proteocephalus jarara (Fuhrmann, 1927) A) Description du type (Figs 1-11) Matérielexaminé: Unscolexetdeuxmorceauxdestrobilesgravidesreprésentant4proglottisentiers(13 B)et 1 strobila immature comprenant un petit scolex (13 A). Nous disposons aussi de 7 coupes transversales et 12 coupes frontales de proglottis immatures, matures et gravides (13 B). Annotations: «Oph., Jarara, 13 A, Brésil, Bresslau» pour le strobila immature avec le petit scolex. «Oph. jarara, 13 B, Brésil, Bresslau» pour le reste du matériel. Hôte selon auteur: Bothrops alternatus Dum., Bibr. & Dum, 1854. Hôte présumé: Bothropsjararaca (Wied, 1824). A 7 REDESCRIPTIONDEPROTEOCEPHALUSJARAR 1 Localité: Barreira (Orgelgebirge, Staat Rio de Janeiro) 13 mars 1914, N° 573ö, Prof. E. Bresslau leg. Localisation: inconnue. Sauf indication contraire, le matériel étudié ci-dessous se réfère aux préparations portant le N° 13 B. Le matériel type de Furhmann (1927) est d'observation assez difficile. Strobila mm mm immature (13 A) long de 70 (50 selon O. Fuhrmann). Strobila (13 B) acraspédote, mm à évolution très lente, fortement aplati dorso-ventralement, mesurant 140 selon O. Fuhrmann. Zone de croissance très longue, de plus de 7,9 mm. Proglottis immatures très courts et très larges, 320-410 de long sur 3220-3520 de large (les premiers proglottis reconnais- sablés sont longs de 68 et larges de 2000 selon O. Fuhrmann). Rapport longueur/largeur 1: 0.034-0.12. En coupes frontales, les proglottis matures sont longs de 425-475 et larges de 3700-3770. Rapport longueur/largeur 1: 0.12. Toujours en coupes frontales, les pre- miers proglottis gravides sont beaucoup plus larges que longs (longs de 405-550 et larges de 3280-3890). Rapport longueur/largeur 1: 0.10-0.17. En préparations totales, les proglottis gravides terminaux sont plus longs que larges (3375-3780 de long sur 890-1350 de large). Rapport longueur/largeur 1: 3.2-4.3. Scolex immature (13 A) d'un diamètre de 905 (et non de 630-680 comme indiqué par O. Fuhrmann) et long de 530, avec un organe apical d'un diamètre de 70. Quatre ventouses d'un diamètre de 275-325. Scolex volumineux (13 B) de 1220 de diamètre et long de 790. Dans ce scolex, on observe un réseau dense de canaux excréteurs émettant quelques canalicules débouchant à la surface du scolex. Organe apical bien visible, d'un diamètre de 70 et profond de 120. Quatre ventouses proéminentes dirigées antérieurement d'un diamètre de 440-490 (fig. 1). Bien que le scolexait étéun peu compressé lors du montage, on distingue une petite inter- ruption de lamargeexterne des ventouses. On observeune abondancedemusculaturecir- culaire dans la partie latérale supérieure des ventouses. Musculaturelongitudinaleinternetrèsdensecomposéedefaisceauxtrèsanastomosés, avec un nombre important de fibres musculaires dorso-ventrales et transversales. Nousnedisposonspasdeproglottismaturesenpréparationtotaleet lestesticulessont inobservables dans les proglottis gravides terminaux. Nous avons à disposition seulement des coupes frontales des proglottis matures et des premiers proglottis gravides. Le dénom- brement des testicules est ainsi imprécis. Nous avons pu reconstituer leur nombre qui s'élève à environ 160. Ces testicules ronds à ovoïdes, sont disposés en deux champs laté- raux bien séparés. Les champs testiculaires sont parfois divisés latéralement par le canal excréteur dorsal. Dans les anneaux matures, les testicules mesurent 75-90 de diamètre et dans les anneauxgravides 55-60dediamètre. On observe unedégénérescencedestesticules dans les anneaux gravides. Poche du cirre à paroi épaisse dans sa partie distale, très allongée dans les anneaux matures et dans les premiers anneaux gravides, longue de 360-440 et large de 75-110 dont la longueur représente 10-12% de la largeur du proglottis. Dans les anneaux gravides ter- minaux, elle est longue de 220-240 et large de 135-195 et sa longueur représente 18-22% de la largeur du proglottis. Poche du cirre située entre les canaux excréteurs dorsaux et ventraux. Cirre invaginé, long de 205-245 et large de 70-80 dans les anneaux matures et dans les premiers anneaux gravides dont la longueur représente 51-61% de la longueur de la poche du cirre (fig. 2). Il est long de 145-155 et large de 95-110 dans les anneaux gravides terminaux et sa longueur représente 57-70% de la longueur de la poche du cirre (fig. 4). 8 ALAINDECHAMBRIER,MARIALUCIAD'ALESSIOETFERNANDOM. DEAZEVEDOCORREA 1 9 REDESCRIPTIONDEPROTEOCEPHALUSJARARA 1 Canal éjaculateur long et contourné, d'un diamètre proximal de 12-25 et distal de 20-36. Canal déférent très sinueux, occupant un champ allongé transversalement vers le centre du proglottis, long de 1150-1230 et large de 70-85 dans les anneaux matures et dans les premiers anneaux gravides et de 270-390 de long et 210-370 de large dans les anneaux gravides terminaux. Il est situé entre la partie proximale de la poche du cirre et la partie médiane de l'utérus. Le vas efferens est réticulé et occupe toute la partie médiane du proglottis. Atrium génital peu profond. Pores génitaux alternant irrégulièrement, situés entre les 44/100-46/100 pour le strobilaimmature (13 A) et entre les45/100et 50/100de lalongueur du proglottis (13 B). Ovairepeu étendu, composé de deux lobes réunis par un mince isthme antérieur situé ventralement par rapport au réceptacle séminal et à l'utéroducte (fig. 11). L'ovaire est largede 1480-1520et longde36-70dans les anneauxmatureset dans les premiers anneaux gravides et sa largeur représente 39-43% de la largeur du proglottis. L'ovaire est large de 425-590 et long de 200-230 dans les proglottis gravides terminaux et sa largeur représente 45-63% de la largeur du proglottis. Vaginantérieur(77%)oupostérieur(23%)aucirre, avecunezonedistaledifférenciée longue de 110-140 et large de 145-160 dans les anneaux gravides terminaux, entourant un puissant sphincter musculaire sub-terminal long de 70-90 (fig. 2). Canal vaginal de 20 de diamètre tournant postérieurement, formant quelques lacets juste avant le réceptacle séminal, et situé dorsalement par rapport à l'utérus (fig. 11). Réceptacle séminal piriforme, d'undiamètrede20-25 et long de 35-50. Ductus seminalis contournéd'un diamètre de 10. Oviducte court, d'un diamètre de 25. Oocapte rond, de 40-45 de diamètre extérieur. Glande de Mehlis peu importante, allongée transversalement, d'un diamètre de 80-150 (fig. 11). L'utéroducte, d'un diamètre d'environ 25, rejoint l'utérus, non pas à son extré- mité postérieure mais juste avant celle-ci. Utérus préformé, c'est-à-dire visible à l'état d'ébauche dans les anneaux immatures. Dans ces anneaux, il est situé ventralement et occupe déjà la quasi-totalité de la longueur duproglottis. Ilestdeformetubulaireetàparoiépaisseavecunelumièredanslesanneaux matures (figs 6, 7, 8, 15). Les diverticules utérins commencent à se former avant la pré- sence des œufs dans l'utérus. Le développement des diverticules utérins est tout à fait particulier. En effet, à partir du tronc utérin situé ventralement, les diverticules rayonnent latéralement et dorsalement en éventailet traversent même lamusculature longitudinale interne dorsalement et parfois ventralement (sur les figures 5 à 10, ainsi que 16 et 17, qui sont des coupes transversales, le côté ventral se situe au pied de l'illustration). Figs 1-5. Proteocephalusjarara(Fuhrmann, 1927), matérieltype. 1.Scolex.Observezlescanaliculesexcréteurs débouchant à la surface du scolex. 2. Poche du cirre et vagin, proglottis mature. 3. Oeuf, examiné dans une préparation totale. 4. Poche du cirre et vagin, vue ventrale, proglottis gravide. 5. Coupe transversale, proglottis gravide. Remarquez les diverticules utérins en éventail et la pénétration de ceux-ci dans le cortex dorsal et ventral. Echelles: 1, 5=500 um; 2, 4=250 ^m; 3=50 |im. Abréviations: cd=canalexcréteurdorsal; cf=cellules flammes; cl=canaliculeexcréteurdébouchant àlasurface; cv=canal excréteurventral; fl=fibre musculairelongitudinale; gm=glandede Mehlis: ml=musculature longitudinale interne; ni=nerf longitudinal latéral; oc=oocapte; od=oviducte; ov=ovaire; rs=réceptacleséminal; ud=utéroducte;ut=utérus;vc=canalvaginal; vt=vitellogènes. 20 ALAINDECHAMBRIER,MARIALUCIAD'ALESSIOETFERNANDOM.DEAZEVEDOCORREA En coupe transversale d'un proglottis gravide, on dénombre ainsijusqu'à 12 diverticules utérins rayonnantàpartirdutroncutérin, disposés enéventail et situés dans lemêmeplan dorso-ventral (fig. 5). L'utérus dans les anneaux gravides terminaux occupe la presque totalité de la longueur du proglottis. D'autre part, dans les proglottis gravides terminaux, l'utérus s'élargit de manière à occuper jusqu'à 62% de la largeur et la presque totalité de la longueur du proglottis gravide, chevauchant parfois l'utérus des anneaux précédents et suivants. Ondénombredechaquecôté 16-20diverticulesutérins dans lesanneauxmatures en coupes frontales et 26-29 diverticules utérins dans les anneaux gravides terminaux. Dans un de ces anneaux gravides terminaux, on constate une ouverture utérine ven- trale ressemblant à celle rencontrée chez Crepidobothrium (de Chambrier 1989&). Dans ce proglottis, l'utérus émet àtravers la musculature longitudinale interne, des diverticules sous la forme de petites hernies dans le cortex dorsal. Il n'y a pas d'ouverture utérine dorsale dans les proglottis gravides. Les vitellogènes sont en partiemédullaires et en partie paramusculaires '. Ils sont dis- posés en deux bandes latérales le long du proglottis sans atteindre les marges antérieure et postérieure de l'anneau, avec une tendance à s'épaissir dans la partie postérieure. Ils ne sont pas interrompus au niveau de la poche du cirre. Ils représentent du côté aporal les 89-94% de la longueur du proglottis, et du côté poral environ le 93% de la longueur du proglottis. Les glandes vitellines ont un diamètre de 16-32. Les vitelloductes, d'un dia- mètre de 4-12 courent ventralement en suivant la marge postérieure de l'anneau, se rejoignant au niveau de l'ootype pour plonger dans la glande de Mehlis. Les canaux excréteurs ventraux sont d'un diamètre irrégulier de 35-75 dans les anneaux matures et dans les premiers anneaux gravides et de 35-45 dans les anneaux gravides terminaux. Ils sont situés à l'extérieur des canaux excréteurs dorsaux. Ces der- niers ont un diamètre plus régulier de 30-40 dans les anneaux matures et dans les premiers anneaux gravides et de 12-18 dans les anneaux gravides terminaux. Ils sont entourés de fibres musculaires longitudinales et transversales qui sont moins nombreuses autour du canal ventral (fig. 9). Celui-ci émet de place en place tout le long du proglottis des petits canaux, d'un diamètre de 6-20, qui débouchent à la surfaceventrale de l'anneau (fig. 10). Le canal ventral et spécialement le canal dorsal sont entourés de très nombreuses cellules flammes (fig. 9). L'oncosphère a un diamètre de 9-11, elle est pourvue de 6 crochetons longs d'environ 7. L'embryophore a un diamètre de 11-12. L'enveloppe externe, très mince est collapsée. 1 C'est-à-direacollés à lamusculature longitudinaleinterne, débordant en partie dans lecortex et en partie dans la medulla (de Chambrier 1990). Figs 6-11. Proteocephalusjarara (Fuhrmann, 1927), matériel type. 6-8. Coupes transversales au niveau de l'utérusmontrantledéveloppementenéventaildesdiverticulesutérins(surcesfigures, lecôtéventral estsituéverslebasdel'illustration).9. Coupetransversale,proglottismature. Notezlapositionpara- musculaire des vitellogènes et les fibres musculaires longitudinales entourant les canaux excréteurs dorsauxetventraux; 10. Coupetransversale, proglottisgravide; 11. Zoneootype, proglottisgravide, vue ventrale. Echelles: 6, 7=200 um; 8, 9 10=250 um; 11= 250 um. Abréviations: cf. figs 1-5. REDESCRIPTIONDEPROTEOCEPHALUSJARARA 21 vCi ml V*A«^i;ioël|^^^ 22 ALAINDECHAMBRIER,MARIALUCIAD'ALESSIOETFERNANDOM.DEAZEVEDOCORREA Discussion: Contrairement à Fuhrmann (1927, p. 391, dernier paragraphe) qui le considère comme une espèce différente, nous attribuons à Proteocephalusjarara le strobila imma- ture (13 A). Bien que le scolex soit plus petit, celui-ci présente les mêmes caractéristiques que le scolex du type (13 B). En outre, la position du pore génital du strobila immature (44-46%) est semblable à celle du matériel type (45-50%). Dans ce matériel type, nous avons remarqué un puissant sphincter vaginal que Fuhrmann n'avait pas observé. De plus, l'affirmation de cet auteur quant à la position antérieure («presque sans exception») du vagin par rapport à la poche du cirre ne se justifie pas. En effet, nous avons rencontré 23% de ces organes femelles en position postérieure. B) Matériel brésilien 1) N° MHNG 12.392 et 12.393 et N° Butantan 6562 et 6563 (figs 12-21) Matériel examiné: 1 exemplaireentier, gravide, débité partiellement en coupes sériées; 1 scolex examiné en microscopie électronique à balayage; 1 scolex débité en coupes sagittales. Hôte: Bothropsjararaca (Wied, 1824). Localité: Santa Tereza, Etat d'Espirito Santo, Brésil, 23.XI.88 (BIB 103). Domingos Martins, Etat d'Espirito Santo, Brésil, 16.X.89 (BIB 331). Localisation: Oesophage, estomac, intestin. Description : a) BIB 103: L'exemplaire mesure 496 mm. Strobila acraspède, à évolution très lente (environ 440 proglottis avant l'apparition des premiers testicules observables, 452 avant le premier proglottis mature, 474 avant l'apparition des premiers diverticules utérins, 500 avant l'apparition des premiers œufs dans l'utérus et environ 710 proglottis au total). La jonction des anneaux est bien nette et elle est marquée à cet endroit par un amincissement du segment latéralement et dorso-ventralement. Scolex de 1240 de diamètre et long de 850. Organe apical bien visible, d'un diamètre de 55 (fig. 12). Quatre ventouses proéminentes dirigées antérieurement d'un diamètre de 505-515 sur 345-455, pourvues de muscles puissants. Il existe un faisceau allongé de mus- culature circulaire situé dans la partie externe supérieure des ventouses (fig. 13). Ces ventouses possèdent une interruption, parfois assez marquée, de leur marge extérieure (fig. 19). On dénombre 150-187 testicules (x=167, n=30, Sd= 10,38, Cv=6,22) ronds à ovoïdes situés plutôt dorsalement dans la medulla (fig. 15). Ils ont un diamètre de 53-85 (x=65, n= 100)danslesproglottismatures, de60-97 (x=75, n=77)danslespremierspro- Figs 12-15. Proteocephalusjarara(Fuhrmann, 1927), matérielrécent. 12. Scolex; 13. Ventouse, coupesagittale. Remarquez l'importance de la musculature circulaire distale de la ventouse; 14. Oeufexaminé dans l'eau, collapse; 15. Proglottis mature, vue ventrale. Echelles: 12, 15=500 um; 13=250 um; 14=50 um. Abréviations: cf. figs 1-5. REDESCRIPTIONDEPROTEOCEPHALUSJARARA 23 24 ALAINDECHAMBRIER,MARIALUCIAD'ALESSIOETFERNANDOM. DEAZEVEDOCORREA glottisgravides etde42-66 (x=57, n=29)dansles proglottisgravides terminaux. Rapport diamètre moyen des testicules matures/longueur de la poche du cirre= 19-23%. Rapport diamètre moyen des testicules gravides/longueur de la poche du cirre= 18-23%. Rapport longueur de lapoche du cirre/largeur du proglottis 9-20% (x= 12%, n=68) (9-11% danslesanneauxmatureset 10-12% danslespremiers anneauxgravideset 16-20% dans les anneaux gravides terminaux). Le cirre occupe les 39-62% (x=52%, n=55, Sd=5,4%, Cv= 10,54) de la longueur de la poche du cirre. Pores génitaux alternant irrégulièrement, situés entre les 43-59% (x=50%, n=66, Sd=3,2%, Cv=6,56) de la longueur du proglottis. Vagin antérieur (56%) ou postérieur (44%, n=206) à la poche du cirre. Utérus préformé. Dans les premiers anneaux matures, il apparaît une lumière dans le tronc utérin (figs 15, 16). A partir de cette lumière, il se forme des diverticules, rayon- nant non seulement latéralement mais aussi dorsalement (fig. 16). L'utérus, déjà dans les anneaux matures, traverse ventralement de place en place la musculature longitudinale interneet forme ainsi de petites hernies dans le cortex (figs 17-18). Dans quelques proglottis gravides, il se produit une invasion des œufs dans le cortex dorsal par rupture de la paroi utérine, occupant la presque totalité de celui-ci sans que ces segments ne présentent d'ouverture utérine dorsale. Cette particularité n'est pas, à notre avis, une structure nor- male, mais un artefact. Ouverture utérine ventrale, ressemblant à celle de Crepidobothrium (figs 20, 21), d'apparition très tardive (186e proglottis après l'apparition des premiers œufs dans l'utérus). Les crochetons des oncospheres dans l'utérus apparaissent déjà à partir du 12e pro- glottis gravide. Les œufs n'envahissent que très lentement l'utérus et l'on dénombre au moins 30 proglottis depuis l'apparition des premiers œufs avant que ceux-ci n'occupent tout le volume de l'utérus. Nous avons dénombré sur les coupes transversales d'un proglottis mature: 80% de follicules vitellins dorsaux et médullaires et 20% dorsaux et paramusculaires; sur les coupes transversalesd'unproglottisgravide, 44% sontdorsauxet médullaireset 56% sont dorsaux et paramusculaires. b) BIB 331: Cet exemplaire est très semblable à celui décrit ci-dessus (BIB 103). N'ayant à disposition qu'un scolex dans le matériel décrit ci-dessus, nous avons utilisé un scolex du lot BIB 331 pour en effectuer des coupes sagittales. Sur une de ces coupes, le faisceau allongé de la musculature circulaire est remarquable dans la partie externe supé- rieure de la ventouse (fig. 13). Nous avons aussi utilisé un scolex provenant de ce matériel pour la photographie au microscope électronique à balayage (fig. 19). Discussion: Ces spécimens correspondent parfaitement à Proteocephalus jarara tel que nous l'avons redécrit. En effet, ils possèdent un scolex et des ventouses identiques, un nombre Fies 16-18. Proteocephalusjarara(Fuhrmann, 1927),matérielrécent. 16. Coupetransversale, proglottismature; 17. Coupetransversale, proglottisgravide; notezlapénétrationdesdiverticulesutérinsdanslecortex dorsal; 18. Proglottis gravide, vue dorsale. Les œufs ne sont pas dessinés dans les figures 17 et 18. Echelles: 500 um. Abréviations: cf. figs 1-5.