B BACTEC™ Plus Aerobic/F Culture Vials Soybean-Casein Digest Broth in a Plastic Vial English: pages 1 – 4 Italiano: pagine 10 – 12  8089074(03) Français : pages 4 – 6 Español: páginas 12 – 15 2016-07 Deutsch: Seiten 7 – 9 Português: páginas 15 – 18 Contact your local BD representative for instructions. / Свържете се с местния представител на BD за инструкзии. / Pokyny vám poskytne místní zástupce společnosti BD. / Kontakt den lokale BD repræsentant for at få instruktioner. / Επικοινωνήστε με τον τοπικό αντιπρόσωπο της BD για οδηγίες. / Kasutusjuhiste suhtes kontakteeruge oma kohaliku BD esindajaga. / Ota yhteys lähimpään BD:n edustajaan ohjeiden saamiseksi. / Kontaktiraj lokalnog predstavnika BD za upute. / A használati utasítást kérje a BD helyi képviseletétől. / Нұсқаулар үшін жергілікті BD өкілімен хабарласыңыз. / Lai saņemtu norādījumus, sazinieties ar vietējo BD pārstāvi. / Naudojimo instrukcijų teiraukitės vietos BD įgaliotojo atstovo. / Neem contact op met uw plaatselijke BD-vertegenwoordiger voor instructies. / Kontakt din lokale BD-representant for mer informasjon. / Aby uzyskać instrukcje użytkowania, skontaktuj się z lokalnym przedstawicielstwem BD. / Contacte o representante local da BD para instruções. / Pentru instrucţiuni, contactaţi reprezentantul local BD. / Для получения указаний обратитесь к местному представителю компании BD. / Inštrukcie získate u miestneho zástupcu spoločnosti BD. / Obratite se svom lokalnom predstavniku kompanije BD za uputstva. / Kontakta närmaste BD-representant för anvisningar. / Talimatlar için yerel BD temsilcinizle temasa geçin. / За інструкціями зверніться до місцевого представника компанії BD. INTENDED USE BD BACTEC™ Plus Aerobic/F medium is used in a qualitative procedure for the aerobic culture and recovery of microorganisms (bacteria and yeast) from blood. The principal use of this medium is with the BD BACTEC fluorescent series instruments. SUMMARY AND EXPLANATION The sample to be tested is inoculated into one or more vials which are inserted into the BD BACTEC fluorescent series instrument for incubation and periodic reading. Each vial contains a chemical sensor which can detect increases in CO2 produced by the growth of microorganisms. The sensor is monitored by the instrument every ten minutes for an increase in its fluorescence, which is proportional to the amount of CO2 present. A positive reading indicates the presumptive presence of viable microorganisms in the vial. Detection is limited to microorganisms that will grow in a particular type of medium. Resins have been described for the treatment of blood specimens both prior to and after their inoculation into culture media. Resins have been incorporated into BD BACTEC culture media to enhance recovery of organisms without a need for special processing.1-3 PRINCIPLES OF THE PROCEDURE If microorganisms are present in the test sample inoculated into the BD BACTEC vial, CO2 will be produced when the organisms metabolize the substrates present in the vial. Increases in the fluorescence of the vial sensor caused by the higher amount of CO2 are monitored by the BD BACTEC fluorescent series instrument. Analysis of the rate and amount of CO2 increase enables the BD BACTEC fluorescent series instrument to determine if the vial is positive, i.e., that the test sample contains viable organisms. REAGENTS The BD BACTEC culture vials contain the following reactive ingredients prior to processing: List of Ingredients BD BACTEC™ Plus Aerobic/F (442023) Processed Water 30 mL w/v Soybean-Casein Digest Broth 3.0% Yeast Extract 0.25% Amino Acids 0.05% Sugar 0.2% Sodium Polyanetholsulfonate (SPS) 0.05% Vitamins 0.025% Antioxidants/Reductants 0.005% Nonionic Adsorbing Resin 13.4% Cationic Exchange Resin 0.9% All BD BACTEC media are dispensed with added CO2. Warnings and Precautions: The prepared culture vials are for in vitro diagnostic use. This product contains dry natural rubber. Pathogenic microorganisms, including hepatitis viruses and Human Immunodeficiency Virus, may be present in clinical specimens. "Standard Precautions"4-7 and institutional guidelines should be followed in handling all items contaminated with blood. Prior to use, each vial should be examined for evidence of contamination such as cloudiness, bulging or depressed septum, or leakage. DO NOT USE any vial showing evidence of contamination. A contaminated vial could contain positive pressure. If a contaminated vial is used for direct draw, gas or contaminated culture media could be refluxed into the patient’s vein. Vial contamination may not be readily apparent. If a direct draw procedure is used, monitor the process closely to avoid refluxing materials into the patient. Prior to use, the user should examine the vials for evidence of damage or deterioration. Vials that are cracked or leaking, or display turbidity, contamination, or discoloration (darkening) should not be used. On rare occasions, a vial neck may be cracked and the neck may break during removal of the flip-off cap or in handling. Also, on rare occa sions a vial may not be sealed sufficiently. In both cases the contents of the vials may leak or spill, especially if the vial is inverted. If the vial has been inoculated, treat the leak or spill with caution, as pathogenic organisms/agents may be present. Before discarding, sterilize all inoculated vials by autoclaving. Positive culture vials for subculturing or staining, etc.: before sampling it is necessary to release gas which often builds up due to microbial metabolism. Sampling should be performed in a biological safety cabinet if possible, and appropriate protective clothing, including gloves and masks, should be worn. See Procedure section for more information on subculturing. To minimize the potential of leakage during inoculation of specimen into culture vials, use syringes with permanently attached needles or BD Luer-Lok™ tips. Storage Instructions The BD BACTEC vials are ready for use as received and require no reconstitution or dilution. Store in a cool, dry place (2–25 °C), out of direct light. SPECIMEN COLLECTION The specimen must be collected using sterile techniques to reduce the chance of contamination. The recommended specimen volume is 8–10 mL. It is recommended that the specimen be inoculated into the BD BACTEC vials at bedside. A 10cc or 20cc syringe with a BD Luer-Lok brand tip is used to draw the sample, or a BD Vacutainer® Brand Needle Holder and a BD Vacutainer Brand Blood Collection Set, BD Vacutainer Safety-Lok™ Blood Collection Set or other tubing “butterfly” set may be used. If using a needle and tubing set (direct draw), carefully observe the direction of blood flow when starting sample collection. The vacuum in the vial will usually exceed 10 mL, so the user should monitor the volume collected by means of the 5 mL graduation marks on the vial label. Sample volumes as low as 3 mL can be used, however, recovery will not be as great as with larger volumes. The inoculated BD BACTEC vial should be transported to the laboratory as quickly as possible. PROCEDURE Remove the flip-off cap from the BD BACTEC vial top and inspect the vial for cracks, contamination, excessive cloudiness in medium, and bulging or indented septums. DO NOT USE if any defect is noted. Before inoculating, swab the septum with alcohol (iodine is NOT recommended). Aseptically inject or draw directly 8–10 mL of specimen per vial. If sample volumes of 3–7 mL are used, recovery will not be as great as with larger volumes (see Limitations of the Procedure). Inoculated aerobic vials should be placed in the BD BACTEC fluorescent series instrument as soon as possible for incubation and monitoring. If placement of an inoculated vial into the instrument has been delayed and visible growth is apparent, it should not be tested in the BD BACTEC fluorescent series instrument, but rather it should be subcultured, Gram-stained and treated as a presumptively positive vial. Vials entered into the instrument will be automatically tested every ten minutes for the duration of the testing protocol period. Positive vials will be determined by the BD BACTEC fluorescent series instrument and identified as such (see the appropriate BD BACTEC Fluorescent Series Instrument User’s Manual). The sensor inside the bottle will not appear visibly different in positive and negative vials, however the BD BACTEC fluorescent series instrument can determine a difference in fluorescence. If at the end of the testing period a negative vial appears visually positive (i.e., chocolatized blood, bulging septum, lysed and/or very darkened blood in BD BACTEC Plus Aerobic/F medium), it should be subcultured and Gram-stained and treated as a presumptively positive vial. Positive vials should be subcultured and Gram-stained. In a great majority of cases, organisms will be seen and a preliminary report can be made to the physician. Subcultures to solid media and a preliminary direct antimicrobial susceptibility test may be prepared from fluid in the BD BACTEC vials. Subculturing: Prior to subculturing, put the vial in an upright position, and place an alcohol wipe over the septum. To release pressure in the vial, use an appropriate venting unit (BD catalog # 249560) or equivalent. The needle should be removed after the pressure is released and before sampling the vial for subculture. The insertion and withdrawal of the needle should be done in a straight-line motion, avoiding any twisting motions. QUALITY CONTROL Quality control requirements must be performed in accordance with applicable local, state and/or federal regulations or accreditation requirements and your laboratory's standard Quality Control procedures. It is recommended that the user refer to pertinent CLSI guidance and CLIA regulations for appropriate Quality Control practices. DO NOT USE culture vials past their expiration date. DO NOT USE culture vials that exhibit any cracks or defects; discard the vial in the appropriate manner. Quality Control Certificates are provided with each carton of media. Quality Control Certificates list test organisms, including ATCC® cultures specified in the CLSI Standard M22, Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. The range of time-to-detection in hours was ≤ 72 hours for each of the organisms listed on the Quality Control Certificate for this medium: • Neisseria meningitidis • Candida glabrata ATCC 13090 ATCC 66032 • Haemophilus influenzae • Staphylococcus aureus ATCC 19418 ATCC 25923 • Streptococcus pneumoniae* • Escherichia coli ATCC 6305 ATCC 25922 • Streptococcus pyogenes • Alcaligenes faecalis ATCC 19615 ATCC 8750 • Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 *CLSI recommended strain 2 For information on Quality Control for the BD BACTEC fluorescent series instrument, refer to the appropriate BD BACTEC Fluorescent Series Instrument User’s Manual. RESULTS A positive sample is determined by the BD BACTEC fluorescent series instrument and indicates the presumptive presence of viable microo rganisms in the vial. LIMITATIONS OF THE PROCEDURE Contamination Care must be taken to prevent contamination of the sample during collection and inoculation into the BD BACTEC vial. A contaminated sample will give a positive reading, but will not indicate a relevant clinical sample. Such a determination must be made by the user based on such factors as type of organism recovered, occurrence of the same organism in multiple cultures, patient history, etc. Recovery of SPS Sensitive Organisms From Blood Samples Because blood can neutralize the toxicity of SPS toward organisms sensitive to SPS, the presence of maximum volumes of blood (8–10 mL) can help to optimize recovery of these organisms. To enhance the growth of SPS sensitive organisms when less than 8 mL of blood is inoculated, additional whole human blood may be added. Some fastidious organisms, such as certain Haemophilus species, require growth factors, such as NAD, or factor V, which are provided by the blood specimen. If the blood specimen volume is 3.0 mL or less, an appropriate supplement may be required for recovery of these organisms. BD BACTEC FOS™ Fastidious Organism Supplement or whole human blood may be used as nutritional supplements. Nonviable Organisms A Gram-stained smear from a culture medium may contain small numbers of nonviable organisms derived from media constituents, staining reagents, immersion oil, glass slides, and specimens used for inoculation. In addition, the patient specimen may contain organisms that will not grow in the culture medium or in media used for subculture. Such specimens should be subcultured to special media as appropriate. Antimicrobial Activity Neutralization of the antimicrobial activity by resins varies depending upon dosage level and timing of specimen collection. The use of supplementary additives should be considered in appropriate situations; as an example, the addition of penicillinase when β-lactam therapy is being employed. Recovery of Streptococcus pneumoniae In aerobic media, S. pneumoniae will typically be visually and instrument positive, but in some cases no organism will be seen on Gram stain or recovered on routine subculture. If an anaerobic vial was also inoculated, the organism can usually be recovered by performing an aerobic subculture of the anaerobic vial, since this organism has been reported to grow well under anaerobic conditions.11 General Considerations Optimum recovery of organisms will be achieved by adding maximum amounts of blood. Published clinical studies have shown that the use of lower blood volumes may adversely affect recovery and/or detection times of organisms.12 Blood may contain antimicrobials or other inhibitors which may slow or prevent the growth of microorganisms. False negative readings may result when certain organisms are present which do not produce enough CO2 to be detected by the system or if significant growth has occurred before placing the vial into the system. In analytical studies, this device recovered 17 of 18 Leuconostoc spp. tested. False positivity may occur when the white blood cell count is high. The default 5 day protocol was utilized for all analytical testing with this device, and protocol lengths of >5 days have not been evaluated. Due to the nature of biological materials in media products and inherent organism variability, the user should be cognizant of potential variable results in the recovery of certain microorganisms. EXPECTED VALUES AND SPECIFIC PERFORMANCE CHARACTERISTICS Performance of the BD BACTEC Plus Aerobic/F medium in glass vials has been established by a number of external clinical studies.1-3,8,9 Seeded laboratory studies performed by BD have shown equivalent performance of the BD BACTEC Plus Aerobic/F medium in plastic vials compared to the BD BACTEC Plus Aerobic/F medium in glass vials.10 The yeasts Candida albicans, C. glabrata, and Cryptococcus neoformans were tested in the analytical testing of this device. AVAILABILITY Cat. No. Description 442023 BD BACTEC™ Plus Aerobic/F Medium REFERENCES 1. Wallis, C. et al. 1980. Rapid isolation of bacteria from septicemic patients by use of an antimicrobial agent removal device. J. Clin. Microbiol. 11:462-464. 2. Applebaum, P.C. et al. 1983. Enhanced detection of bacteremia with a new BACTEC resin blood culture medium. J. Clin. Microbiol. 17:48-51. 3. Pohlman, J.K. et al. 1995. Controlled clinical comparison of Isolator and BACTEC 9240 Aerobic/F resin bottle for detection of bloodstream infections. J. Clin. Microbiol. 33:2525-2529. 4. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2005. Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed. CLSI, Wayne, Pa. 5. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: 53-80. 6. U.S. Department of Health and Human Services. 2007. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 5th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 3 7. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 8. Smith, J.A. et al. 1995. Comparison of BACTEC 9240 and BacT/Alert blood culture systems in an adult hospital. J. Clin. Microbiol. 33:1905-1908. 9. Flayhart, D. et al. 2007. Comparison of BACTEC Plus blood culture media to BacT/Alert FA blood culture media for detection of bacterial pathogens in samples containing therapeutic levels of antibiotics. J. Clin. Microbiol. 45:816-821. 10. Data available from BD Life Sciences. 11. Howden, R.J. 1976. Use of anaerobic culture for the improved isolation of Streptococcus pneumoniae. J. Clin. Pathol. 29:50-53. 12. IIstrup, Duane M. and John A. Washington. 1983. The importance of volume of blood cultured in the detection of bacteremia and fungemia. Diagn. Microbiol. Infect Dis. 1:107-110. Technical Information: In the United States contact BD Technical Service and Support at 1.800.638.8663 or www.bd.com. B B ACTEC Plus Aerobic/F Culture Vials Bouillon digéré de soja-caséine en flacon plastique Français APPLICATION Le milieu BD BACTEC Plus Aerobic/F serve à une procédure qualitative de culture aérobie et de mise en évidence des microorganismes (bactéries et levures) du sang. Ce milieu est essentiellement utilisé avec les appareils BD BACTEC de la série à fluorescence. RESUME ET EXPLICATION L'échantillon à analyser est ensemencé dans un ou plusieurs flacons qui sont ensuite placés dans un appareil BD BACTEC de la série à fluorescence pour être incubés et lus périodiquement. Chaque flacon contient un détecteur chimique qui détecte toute augmentation en CO2 résultant de la croissance des microorganismes. L'appareil contrôle ce détecteur toutes les dix minutes en recherchant une augmentation de la fluorescence qui est proportionnelle à la quantité de CO2 présent. Une lecture positive indique la présence présumée de microorganismes viables dans le flacon. La détection se limite aux microorganismes pouvant se développer dans un type particulier de milieu de culture. Des résines ont été décrites pour préparer les échantillons de sang avant et après leur ensemencement sur les milieux de culture. De telles résines ont été incorporées dans les milieux de culture BD BACTEC afin d'améliorer la mise en évidence des microorganismes sans avoir à recourir à des préparations spéciales.1-3 PRINCIPES DE LA METHODE Si des microorganismes sont présents dans l’échantillon inoculé dans le flacon BD BACTEC, ils métabolisent les substrats contenus dans le flacon et produisent du CO2. L'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence surveille à la recherche de toute augmentation de la fluorescence du détecteur du flacon due à un accroissement de la quantité de CO2. L'analyse de l'accroissement, taux et quantité, du CO2 permet à l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence de déterminer si le flacon est positif, c'est-à-dire si l'échantillon contient des organismes viables. REACTIFS Avant traitement, les flacons de culture BD BACTEC contiennent les réactifs suivants : Liste des composants BD BACTEC Plus Aerobic/F (442023) Eau traitée 30 mL poids/vol Bouillon digéré de soja-caséine 3,0% Extrait de levure 0,25% Aminoacides 0,05% Sucre 0,2% Polyanétholsulfonate de sodium (PSS) 0,05% Vitamines 0,025% Antioxydants/réducteurs 0,005% Résine adsorbante non ionique 13,4% Résine échangeuse de cations 0,9% Tous les milieux BD BACTEC sont fournis avec CO2. Avertissements et précautions : Les flacons de culture fournis sont destinés au diagnostic in vitro. Ce produit contient du caoutchouc naturel sec. Des microorganismes pathogènes, notamment les virus de l’hépatite et de l’immunodéficience humaine, sont susceptibles d’être présents dans les échantillons cliniques. Respecter les « Précautions standard »4-7 et les consignes en vigueur dans l’établissement pour manipuler tout objet contaminé avec du sang. Avant utilisation, il convient d’examiner les flacons pour vérifier l’absence de toute contamination, à savoir turbidité, bouchon protubérant ou enfoncé, ou de fuite. NE PAS UTILISER les flacons présentant des signes de contamination. Les flacons contaminés peuvent être sous pression. Si un flacon contaminé est utilisé pour un prélèvement direct, des gaz ou du milieu contaminé pourraient être refoulés dans la veine du patient. La contamination du flacon peut ne pas être visible. Si une procédure de prélèvement direct est utilisée, surveillez de près la procédure pour éviter tout reflux de matériaux dans le patient. 4 Avant utilisation, il convient d’examiner les flacons pour vérifier l’absence d’endommagement ou de détérioration. Ne pas utiliser un flacon fissuré ou qui fuit, ou dont le milieu est trouble, contaminé ou décoloré (foncé). Occasionnellement, il peut arriver que le goulot d’un flacon soit fêlé et se rompe lors du retrait de la capsule de protection ou pendant les manipulations. Il peut aussi arriver qu’un flacon ne soit pas hermétiquement bouché. Dans les deux cas, le contenu du flacon risque de fuir ou de se répandre, surtout si le flacon est inversé. Si le flacon a été ensemencé, traiter la fuite ou le liquide répandu avec précaution en raison de la présence éventuelle de microorganismes ou d’agents pathogènes. Stériliser à l’autoclave les flacons ensemencés avant de les jeter. Flacons contenant une culture positive destinée au repiquage ou à la coloration, etc. : avant de faire un prélèvement, il est nécessaire de libérer tout gaz accumulé résultant du métabolisme bactérien. Les prélèvements doivent être effectués dans une hotte biologique de sécurité, si possible, et il convient de porter des vêtements de protection appropriés, dont gants et masque. Pour plus d’informations sur le repiquage, voir la rubrique Méthode. Afin de minimiser les risques de fuite pendant l’ensemencement des échantillons dans les flacons de culture, utiliser des seringues munies d’aiguilles ou d’embouts BD Luer-Lok inamovibles. Instructions Pour La Conservation Les flacons BD BACTEC sont reçus prêt à l'emploi et ne demandent aucune reconstitution ou dilution. Les conserver dans un endroit frais et sec (2 à 25 °C), à l'abri de la lumière directe. PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS Les échantillons doivent être recueillis de façon aseptique afin de réduire les risques de contamination. Le volume d’échantillon conseillé est de 8 à 10 mL. Il est conseillé d’ensemencer les flacons BD BACTEC au chevet du malade. On peut utiliser une seringue de 10cc ou 20cc avec un embout BD Luer-Lok pour prélever l'échantillon, ou encore un porte-aiguille BD Vacutainer et un système de prélèvement sanguin BD Vacutainer, un système de prélèvement sanguin BD Vacutainer Safety-Lok ou autre système à ailettes. Si on utilise une aiguille et un système de tubes (prélèvement direct), il faut observer soigneusement la direction du flot sanguin au moment où le prélèvement de l'échantillon est démarré. Le vide dans le flacon en général dépasse 10 mL, de sorte que l'utilisateur doive surveiller le volume prélevé au moyen des graduations de 5 mL sur l'étiquette du flacon. Des petits volumes d'échantillons de l'ordre de 3 mL peuvent être utilisés, toutefois la mise en évidence ne sera pas aussi bonne qu'avec les plus grands volumes. Le flacon BD BACTEC inoculé doit être envoyé le plus rapidement possible au laboratoire. METHODE Retirer la capsule de protection du flacon BD BACTEC et vérifier l’absence de fissure, de contamination, de turbidité excessive du milieu, de bouchon protubérant ou en dépression. NE PAS UTILISER le flacon si on note un tel défaut. Avant d'ensemencer, tamponner le bouchon avec de l’alcool (l’utilisation d’iode N’EST PAS recommandée). Injecter aseptiquement ou extraire directement 8 à 10 mL d'échantillon par flacon. Si des volumes d'échantillon de l'ordre de 3 à 7 mL sont utilisés, la mise en évidence ne sera pas aussi importante qu'avec les plus grands volumes (voir Limites de la méthode). Les flacons aérobies ensemencés doivent être placés dans l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence dès que possible pour être incubés et suivis. Si le placement dans l'appareil d'un flacon ensemencé a été retardé et qu'une croissance est visible, il ne doit pas être testé dans l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence, mais plutôt il doit être repiqué, soumis à une coloration de Gram et traité comme un flacon présumé positif. Les flacons placés dans l'appareil seront automatiquement testés toutes les 10 minutes pendant toute la durée du protocole de test. Les flacons positifs seront reconnus et identifiés comme tels par l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence (voir le manuel d'utilisation de l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence approprié). Le détecteur à l'intérieur du flacon n'apparaîtra pas visiblement différent dans les flacons positifs et les flacons négatifs, mais l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence sera lui capable de déterminer une différence dans la fluorescence. Si à la fin de la période de test, un flacon négatif apparaît visuellement positif (par ex., sang couleur chocolat, bouchon protubérant, sang lysé et/ou très sombre dans un milieu BD BACTEC Plus Aerobic/F), il doit être repiqué, soumis à une coloration de Gram et traité comme un flacon présumé positif. Les flacons positifs doivent être repiqués et soumis à une coloration de Gram. Dans la grande majorité des cas, les organismes seront visibles et un rapport préliminaire pourra être fait au médecin. Les repiquages sur milieux solides et un test préliminaire direct de sensibilité aux antibiotiques pourront être préparés directement à partir du liquide dans les flacons BD BACTEC. Repiquage : Avant d’effectuer un repiquage, poser le flacon debout et placer un coton imbibé d’alcool sur le bouchon. Pour relâcher la pression dans le tube, utiliser un évent approprié (référence BD n° 249560) ou équivalent. L’aiguille doit être retirée après le relâchement de la pression et avant de faire un prélèvement pour repiquage. L’insertion et le retrait de l’aiguille doivent être faits avec un mouvement rectiligne, en évitant tout mouvement de torsion. CONTROLE DE QUALITE Effectuer les contrôles de qualité conformément aux réglementations locales, nationales et/ou internationales en vigueur, aux exigences des organismes d’homologation concernés et aux procédures de contrôle de qualité en vigueur dans l’établissement. Il est recommandé à l’utilisateur de consulter les directives CLSI et la réglementation CLIA correspondantes pour plus d’informations sur les modalités de contrôle de qualité. NE PAS UTILISER les flacons de culture au-delà de leur date de péremption. NE PAS UTILISER de flacon de culture fêlé ou défectueux ; éliminer ces flacons conformément aux procédures en vigueur. Des certificats de contrôle de qualité se trouvent dans chaque carton de milieux. Les certificats de contrôle de qualité dressent la liste des microorganismes de test, y compris les cultures ATCC spécifiées dans la norme CLSI M22, Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. Le délai de détection en heures était ≤ 72 heures pour chacun des organismes figurant sur le certificat de contrôle de qualité pour ce milieu. • Neisseria meningitidis • Candida glabrata ATCC 13090 ATCC 66032 • Haemophilus influenzae • Staphylococcus aureus ATCC 19418 ATCC 25923 • Streptococcus pneumoniae* • Escherichia coli ATCC 6305 ATCC 25922 5 • Streptococcus pyogenes • Alcaligenes faecalis ATCC 19615 ATCC 8750 • Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 *Souche recommandée par le CLSI Pour une information concernant le Contrôle Qualité pour l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence, se reporter au manuel d'utilisation de l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence approprié. RESULTATS Un échantillon positif est identifié par l'appareil BD BACTEC de la série à fluorescence et signale la présence présumée de microorganismes viables dans le flacon. LIMITES DE LA METHODE Contamination Veiller à ne pas contaminer l’échantillon au cours du prélèvement et de l’ensemencement dans le flacon BD BACTEC. Un échantillon contaminé donnera une lecture positive mais n’indiquera pas un échantillon à valeur clinique. Cette détermination doit être effectuée par l’utilisateur sur la base de facteurs comme le type de microorganisme récupéré, l’apparition du même microorganisme dans plusieurs cultures, les antécédents du malade, etc. Isolement d’organismes sensibles au PSS à partir de sang Compte tenu du fait que le sang peut neutraliser la toxicité du PSS envers les organismes sensibles au PSS, la présence de volumes maximaux de sang (de 8 à 10 mL) peut aider à l’optimisation de la mise en évidence de ces organismes. Pour augmenter la croissance d’organismes sensibles au PSS quand un volume de sang inférieur à 8 mL est ensemencé, on peut ajouter du sang humain total. Certains organismes exigeants, tels que les espèces d'Haemophilus, requièrent des facteurs de croissance, comme NAD ou le facteur V, qui sont fournis par l'échantillon de sang. Si le volume de l'échantillon de sang est 3,0 mL ou moins, un complément adéquat peut s'avérer nécessaire pour la mise en évidence de ces organismes. Le BD BACTEC FOS Fastidious Organism Supplement (complément pour organisme exigeant) ou du sang entier humain peuvent être utilisés comme compléments nutritifs. Organismes non-viables Un frottis de Gram réalisé à partir d'un milieu de culture peut contenir des petits nombres d'organismes non viables provenant des composants du milieu, des réactifs de coloration, de l'huile d'immersion, des lames en verre, et des échantillons utilisés pour l'ensemencement. De plus, l'échantillon du patient peut contenir des organismes qui ne croîtront pas dans le milieu de culture ou dans les milieux de repiquage. De tels échantillons doivent être repiqués sur des milieux spéciaux comme approprié. Activité antimicrobienne La neutralisation de l’activité antimicrobienne par les résines varie selon le niveau de dosage et le moment du prélèvement de l’échantillon. L'utilisation d’additifs supplémentaires devra être considérée dans des situations appropriées; par exemple, l’addition de pénicillinase lorsqu’un traitement à base de β-lactame est utilisé. Isolement de Streptococcus pneumoniae Sur les milieux aérobies, S. pneumoniae sera en général positif à l'œil nu et selon l'instrument, mais dans certains cas aucun organisme ne sera visible par la coloration de Gram ou mis en évidence par les repiquages de routine. Si un flacon anaérobie a aussi été ensemencé, l'organisme peut en général être mis en évidence par un repiquage aérobie du flacon anaérobie puisqu'il a été rapporté que cet organisme se développait bien dans des conditions anaérobies.11 Considérations générales La mise en évidence optimale des organismes peut être obtenue en ajoutant les quantités de sang maximum. Les études cliniques publiées ont montré que that l'utilisation de plus petits volumes peut affecter négativement la mise en évidence et/ou les délais de détection des organismes.12 Le sang peut contenir des agents antimicrobiens ou d’autres inhibiteurs qui peuvent ralentir ou empêcher la croissance des microorganismes. Des cultures faussement négatives peuvent être observées en présence de certains microorganismes qui produisent du CO2 en quantité insuffisante pour être détecté par le système ou si une croissance considérable s’est produite avant l’introduction du flacon dans le système. Dans les études analytiques, ce dispositif a mis en evidence 17 sur 18 souches de Leuconostoc spp. testées. Des faux positifs peuvent être obtenus quand le nombre de globules blancs sanguins est élevé. Dans toutes les expériences analytiques effectuées sur ce dispositif on a utilisé par défaut le protocole de 5 jours ; on n'a pas évalué de durées de protocole >5 jours. En raison de la nature du matériel biologique présent dans les milieux de culture et de la variabilité inhérente aux microorganismes, l’utilisateur doit savoir qu’une variation des résultats est possible lors de la mise en évidence de certains microorganismes. VALEURS ATTENDUES ET CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES DE PERFORMANCES La performance du milieu BD BACTEC Plus Aerobic/F en flacon de verre a été établie par un certain nombre d'études cliniques externes.1-3,8,9 Des études de laboratoire sur échantillons ensemencés effectuées par BD ont montré que la performance du milieu BD BACTEC Plus Aerobic/F en flacon plastique était équivalente à celle du milieu BD BACTEC Plus Aerobic/F en flacon de verre.10 Les levures Candida albicans, C. glabrata, et Cryptococcus neoformans ont été testées dans les expériences analytiques effectuées sur ce dispositif. CONDITIONNEMENT N° ref. Description 442023 BD BACTEC Plus Aerobic/F Medium REFERENCES : voir la rubrique "References" du texte anglais Service et assistance technique : contacter votre représentant local de BD ou consulter le site www.bd.com. 6 B B ACTEC Plus Aerobic/F Culture Vials Casein-Soja-Pepton-Bouillon in Plastikfläschchen Deutsch VERWENDUNGSZWECK Das BD BACTEC Plus Aerobic/F-Medium wird in einem qualitativen Verfahren zur Kultivierung aerober Mikroorganismen sowie zur Isolierung von Mikroorganismen (Bakterien und Hefepilzen) aus Blut eingesetzt. Dieses Medium wird vornehmlich zusammen mit den BD BACTEC-Geräten der Fluoreszenz-Serie verwendet. ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG Ein oder mehrere Fläschchen, die zur Inkubation und regelmäßigen Messung in das BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie gestellt werden, werden mit der zu testenden Probe inokuliert. Jedes Fläschchen ist mit einem chemischen Sensor ausgestattet, mit dem gemessen werden kann, wenn der CO2-Gehalt durch das Wachstum von Mikroorganismen ansteigt. Das Gerät überprüft alle zehn Minuten, ob der Sensor einen Fluoreszenzanstieg anzeigt, der proportional zum aktuellen CO2-Gehalt ist. Ein positiver Befund zeigt die präsumtive Anwesenheit von lebensfähigen Mikroorganismen im Fläschchen an. Der Nachweis ist auf die in einer bestimmten Medienart zum Wachstum fähigen Mikroorganismen beschränkt. Kunstharze wurden zur Behandlung von Blutproben vor und nach ihrer Inokulation in Kulturmedien in der Literatur beschrieben. Die Kunstharze wurden den BD BACTEC-Kulturmedien zugesetzt, um die Isolierung von Organismen zu verbessern, ohne dass dabei besondere Aufbereitungsschritte nötig werden.1-3 VERFAHRENSGRUNDLAGEN Falls die in das BD BACTEC-Fläschchen inokulierte Probe Mikroorganismen enthält, wird beim Abbau der in dem Fläschchen enthaltenen Substrate durch die Organismen CO2 erzeugt. Das BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie überwacht den durch den höheren CO2-Gehalt verursachten Fluoreszenzanstieg des Sensors im Fläschchen. Durch die Analyse der CO2-Anstiegsrate und der Zunahme des CO2-Gehalts kann das BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie feststellen, ob die Probe lebensfähige Mikroorganismen enthält und der Befund für das Fläschchen somit positiv ist. REAGENZIEN Die BD BACTEC-Kulturfläschchen enthalten vor der Aufbereitung die folgenden reaktiven Bestandteile: Liste der Bestandteile BD BACTEC Plus Aerobic/F (442023) Demineralisiertes Wasser 30 mL Gew./Vol. Casein-Soja-Pepton-Bouillon 3,0% Hefeextrakt 0,25% Aminosäuren 0,05% Zucker 0,2% Natriumpolyanetholsulfonat (NPS) 0,05% Vitamine 0,025% Antioxidantien/Reduktionsmittel 0,005% Nicht ionisches Adsorptionsharz 13,4% Kationenaustauscherharz 0,9% Alle BD BACTEC-Medien werden mit CO2-Zusatz abgefüllt. Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen: Die gebrauchsfertigen Kulturfläschchen sind zur In-vitro-Diagnostik vorgesehen. Dieses Produkt enthält Naturkautschuk (getrocknet). Klinische Proben können pathogene Mikroorganismen, wie z. B. Hepatitis-Viren und HIV, enthalten. Beim Umgang mit allen mit Blut kontaminierten Artikeln sind die „Allgemeinen Vorsichtsmaßnahmen“ 4-7 sowie die einschlägigen Richtlinien der jeweiligen Einrichtung zu beachten. Vor Gebrauch muss jedes Fläschchen auf Anzeichen von Kontamination wie Trübung, Wölbung oder Einbeulung des Septums oder auf undichte Stellen untersucht werden. Fläschchen, die Anzeichen von Kontamination aufweisen, NICHT VERWENDEN. Kontaminierte Fläschchen können Überdruck erzeugen. Wenn kontaminierte Fläschchen zur direkten Blutentnahme verwendet werden, können Gas oder kontaminierte Kulturmedien in die Vene des Patienten zurückgeführt werden. Die Kontamination eines Fläschchens ist nicht in allen Fällen sichtbar. Bei direkter Blutentnahme sollte der Entnahmevorgang genau überwacht werden, um einen Rückfluss von Substanzen in die Vene des Patienten zu vermeiden. Die Fläschchen müssen vor Gebrauch auf Anzeichen von Beschädigung oder Verfall des Inhalts untersucht werden. Fläschchen, die Sprünge, undichte Stellen, Trübung, Kontamination oder Verfärbung (Dunkelwerden) aufweisen, dürfen nicht verwendet werden. In seltenen Fällen kann der Fläschchenhals einen Sprung haben und beim Entfernen des Abrissdeckels oder während der Handhabung des Fläschchens brechen. Auch kann es in seltenen Fällen vorkommen, dass ein Fläschchen nicht richtig verschlossen ist. In beiden Fällen ist es möglich, dass der Fläschcheninhalt ausläuft oder verschüttet wird, besonders wenn das Fläschchen auf den Kopf gestellt wird. Falls das betreffende Fläschchen bereits inokuliert war, muss das ausgelaufene oder verschüttete Medium mit äußerster Vorsicht behandelt werden, da es pathogene Organismen oder Erreger enthalten kann. Vor ihrer Entsorgung müssen alle inokulierten Fläschchen im Autoklaven sterilisiert werden. 7 Positive Kulturfläschchen zur Subkultivierung oder Färbung usw.: Vor der Probenentnahme muss Gas abgelassen werden, das sich häufig als Folge mikrobiellen Stoffwechsels ansammelt. Die Probenentnahme sollte möglichst in einer biologischen Sicherheitswerkbank durchgeführt werden, und Schutzkleidung, einschließlich Handschuhe und Gesichtsmaske, sollte getragen werden. Nähere Einzelheiten zur Subkultivierung sind dem Abschnitt „Verfahren“ zu entnehmen. Um potentiellen Sickerverlust bei der Inokulation von Proben in die Kulturfläschchen so weit wie möglich auszuschließen, sollten Spritzen mit fest eingesetzten Kanülen oder mit BD Luer-Lok-Kegeln verwendet werden. Aufbewahrung Die BD BACTEC-Fläschchen werden gebrauchsfertig geliefert und erfordern keine Rekonstituierung oder Verdünnung. Kühl und trocken (2–25 °C) lagern und vor direkter Lichteinstrahlung schützen. PROBENENTNAHME Die Proben müssen unter Anwendung steriler Verfahren entnommen werden, um das Risiko von Kontamination zu verringern. Die empfohlene Probenmenge ist 8–10 mL. Es wird empfohlen, die Probe am Krankenbett in die BD BACTEC-Fläschchen zu inokulieren. Zur Blutentnahme können eine 10-cc- oder 20-cc-Spritze mit BD Luer-Lok-Kegel oder ein BD Vacutainer-Kanülenhalter und ein BD Vacutainer-Blutentnahme-Set, ein BD Vacutainer Safety-Lok-Blutentnahme-Set oder ein anderes Butterfly-Schlauchset verwendet werden. Beobachten Sie bei Verwendung einer Kanüle und eines Schlauchsets (direkte Blutentnahme) genau die Richtung des Blutflusses, wenn Sie mit der Probenentnahme beginnen. Das Luftvolumen im Fläschchen beträgt i. d. R. über 10 mL. Daher sollte der Anwender die entnommene Probenmenge anhand der 5-mL-Einteilung auf dem Etikett des Fläschchens überprüfen. Ein Probenvolumen von nur 3 mL kann zwar verwendet werden, eignet sich aber nicht so gut zur Isolierung von Mikroorganismen wie größere Volumina. Das inokulierte BD BACTEC-Fläschchen sollte so schnell wie möglich zum Labor geschickt werden. VERFAHREN Den Abrissdeckel auf dem BD BACTEC-Fläschchen entfernen und das Fläschchen auf Sprünge, Kontamination, starke Trübung im Medium und Wölbung oder Einbeulung der Septa überprüfen. Defekte Fläschchen NICHT VERWENDEN. Vor dem Inokulieren das Septum mit Alkohol abtupfen (die Verwendung von Jod wird NICHT empfohlen). Pro Fläschchen 8–10 mL der Probe aseptisch injizieren oder direkt entnehmen. Probenvolumina zwischen 3 und 7 mL eignen sich nicht so gut zur Isolierung von Mikroorganismen wie größere Volumina (siehe „Verfahrensbeschränkungen“). Inokulierte aerobe Fläschchen sollten so schnell wie möglich zur Inkubation und Überwachung in die BD BACTEC-Geräte der Fluoreszenz- Serie gestellt werden. Wenn ein inokuliertes Fläschchen nicht rechtzeitig in das Gerät gestellt wurde und Wachstum erkennbar ist, sollte es nicht im BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie getestet werden. Stattdessen sollte eine Subkultur angelegt, gramgefärbt und die Probe als präsumtiv positives Fläschchen behandelt werden. Sobald Fläschchen in das Gerät gestellt werden, werden sie während der Testprotokollaufnahme-Periode automatisch alle 10 Minuten getestet. Positive Fläschchen werden vom BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie ermittelt und als positiv identifiziert (siehe Benutzerhandbuch des entsprechenden BD BACTEC-Geräts der Fluoreszenz-Serie). Bei positiven und negativen Fläschchen ist am Sensor im Fläschchen kein sichtbarer Unterschied zu erkennen. Das BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie kann jedoch einen Unterschied bei der Fluoreszenz feststellen. Wenn ein negatives Fläschchen nach der Testperiode bei Sichtprüfung positiv erscheint (d. h. das Blut im BD BACTEC Plus Aerobic/F medium schokoladenartig, lysiert und/oder stark verdunkelt bzw. das Septum gewölbt aussieht), sollte eine Subkultur angelegt, gramgefärbt und die Probe als präsumtiv positives Fläschchen behandelt werden. Für positive Fläschchen sollte eine Subkultur angelegt und eine Gramfärbung durchgeführt werden. In den meisten Fällen sind Organismen erkennbar, so dass dem Arzt ein vorläufiger Befund vorgelegt werden kann. Subkulturen der entsprechenden Festmedien und ein direkter antimikrobieller Empfindlichkeits-Vorabtest können mit der Flüssigkeit in den BD BACTEC-Fläschchen zubereitet werden. Subkultivierung: Vor der Subkultivierung das Fläschchen aufrecht stellen und das Septum mit einem Alkoholtupfer abdecken. Zur Entlüftung des Fläschchens wird der Gebrauch einer geeigneten Entlüftungseinheit (BD-Bestell-Nr. 249560) oder einer vergleichbaren Vorrichtung empfohlen. Nach Entweichen des Überdrucks und vor der Probenentnahme für Subkulturen sollte die Entlüftungskanüle entfernt werden. Das Einstechen und Zurückziehen der Kanüle sollte mit einer geradlinigen Bewegung ohne Drehungen ausgeführt werden. QUALITÄTSKONTROLLE Die Qualitätskontrollen müssen unter Einhaltung der örtlich, landesweit und/oder bundesweit geltenden Bestimmungen oder Auflagen der Akkreditierungsorganisationen sowie der Standard-Qualitätskontrollverfahren Ihres Labors erfolgen. Anwendern wird geraten, die relevanten CLSI- Richtlinien und CLIA-Vorschriften über geeignete Maßnahmen zur Qualitätskontrolle einzusehen. Die Kulturfläschchen dürfen NICHT nach dem Verfallsdatum VERWENDET werden. Fläschchen, die Sprünge oder Beschädigungen aufweisen, dürfen NICHT VERWENDET werden; Fläschchen ordnungsgemäß entsorgen. Qualitätskontrollzertifikate sind jedem Karton mit Medien beigefügt. In den Qualitätskontrollzertifikaten sind Testorganismen, einschließlich im CLSI-Standard M22, Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media, spezifizierte ATCC-Kulturen, aufgeführt. Der Nachweiszeitraum in Stunden für jeden im Qualitätskontrollzertifikat für dieses Medium aufgeführten Organismus lag bei ≤72 Stunden. • Neisseria meningitidis • Candida glabrata ATCC 13090 ATCC 66032 • Haemophilus influenzae • Staphylococcus aureus ATCC 19418 ATCC 25923 • Streptococcus pneumoniae* • Escherichia coli ATCC 6305 ATCC 25922 • Streptococcus pyogenes • Alcaligenes faecalis ATCC 19615 ATCC 8750 • Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 *Vom CLSI empfohlener Stamm 8 Informationen bezüglich der Qualitätskontrolle für Ihr BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie finden Sie im Benutzerhandbuch des entsprechenden BD BACTEC-Geräts der Fluoreszenz-Serie. ERGEBNISSE Positive Proben werden vom BD BACTEC-Gerät der Fluoreszenz-Serie ermittelt. Ein positiver Befund zeigt die präsumtive Anwesenheit von lebensfähigen Mikroorganismen im Fläschchen an. VERFAHRENSBESCHRÄNKUNGEN Kontamination Eine Kontamination der Probe während der Probenentnahme oder der Inokulation in das BD BACTEC-Fläschchen muss vermieden werden. Eine kontaminierte Probe ergibt einen positiven Wert ohne klinische Relevanz. Eine entsprechende Beurteilung muss vom Anwender auf der Basis von Faktoren, wie z. B. der Art des isolierten Organismus, dem Vorkommen desselben Organismus in mehreren Kulturen, der Anamnese des Patienten usw., vorgenommen werden. Isolierung NPS-empfindlicher Organismen aus Blutproben Weil Blut die Toxizität von NPS gegenüber NPS-empfindlichen Organismen neutralisieren kann, können maximale Blutmengen (8–10 mL) dazu beitragen, die Isolierung dieser Organismen zu optimieren. Wenn weniger als 8 mL Blut inokuliert worden sind, kann zur Wachstumsverbesserung NPS-empfindlicher Organismen Human-Vollblut zugegeben werden. Einige anspruchsvolle Organismen (darunter bestimmte Haemophilus-Spezies) benötigen Wachstumsfaktoren wie NAD oder den Faktor V, die von der Blutprobe geliefert werden. Bei einer Blutprobenmenge von 3,0 mL oder weniger muss die Probe zur Isolierung dieser Organismen ggf. entsprechend angereichert werden. Zur Anreicherung der Wachstumsmedien eignet sich BD BACTEC FOS Fastidious Organism Supplement (Anreicherung für anspruchsvolle Organismen) oder humanes Vollblut. Nicht lebensfähige Organismen Ein gramgefärbter Ausstrich von einem Kulturmedium kann eine geringe Anzahl nicht lebensfähiger Organismen aus Medienbestandteilen, Färbereagenzien, Immersionsöl, Glasobjektträgern und den zur Inokulation verwendeten Proben enthalten. Darüber hinaus kann die Patientenprobe Organismen enthalten, die in dem Kulturmedium bzw. in dem für die Subkultivierung verwendeten Medium nicht wachstumsfähig sind. Subkulturen aus solchen Proben sollten unter Verwendung geeigneter Spezialmedien angelegt werden. Antimikrobielle Aktivität Der Grad der Neutralisierung antimikrobieller Aktivität durch Kunstharze variiert und hängt von der Dosierung und dem Zeitpunkt der Probenentnahme ab. Die Verwendung ergänzender Additive sollte in entsprechenden Situationen erwogen werden; so kann z.B. in Fällen, in denen β-lactam-Therapie angewandt wird, Penizillinase hinzugefügt werden. Isolierung von Streptococcus pneumoniae In aeroben Medien ergeben die Sichtprobe und die Instrumentenanalyse für S. pneumoniae i. d. R. einen positiven Befund. In manchen Fällen kann jedoch kein Organismus durch Gramfärbung erkannt bzw. durch übliche Subkultivierung isoliert werden. Wenn auch ein anaerobes Fläschchen inokuliert wurde, kann der Organismus meist durch Anlegen einer aeroben Subkultur aus dem anaeroben Fläschchen isoliert werden, da dieser Organismus Berichten zufolge in anaeroben Umgebungen ein gutes Wachstum zeigt.11 Allgemeine Erwägungen Eine optimale Gewinnung von Organismen kann erzielt werden, indem die maximale Menge Blut beigefügt wird. Veröffentlichte klinische Studien haben gezeigt, dass eine geringere Blutmenge die Isolierung und/oder die Nachweiszeiten von Organismen negativ beeinflussen kann.12 Blut kann antimikrobielle Substanzen oder andere Inhibitoren enthalten, die das Wachstum von Mikroorganismen verlangsamen oder verhindern können. Wenn bestimmte Organismen vorhanden sind, die nicht genug CO2 produzieren, um vom Gerät festgestellt zu werden oder wenn das Fläschchen sichtbares Wachstum aufweist, bevor es in das Gerät gestellt wird, können sich falsch-negative Werte ergeben. In analytischen Studien, diese Testvorrichtung isolierte 17 von 18 getesteten Leuconostoc spp. Falsch-positive Resultate können bei einer hohen Leukozytenzahl zu Stande kommen. Fuer alle analytischen Tests mit dieser Testvorrichtung wurde das Standard 5-Tage-Protokoll angewendet. Protokolldauern von mehr als 5 Tagen wurden nicht untersucht. Der Anwender sollte sich bewusst sein, dass unterschiedliche Ergebnisse beim Nachweis bestimmter Keime auftreten können. Dies ist auf die Natur der in Kulturmedien enthaltenen biologischen Stoffe und auf die natürliche Variabilität von Mikroorganismen zurückzuführen. ZU ERWARTENDE WERTE UND SPEZIFISCHE LEISTUNGSMERKMALE Die Leistungsfähigkeit des BD BACTEC Plus Aerobic/F-Mediums in Glasfläschchen wurde in einer Reihe externer klinischer Studien ermittelt.1-3,8,9 Laborstudien von BD mit beimpften Proben haben ergeben, dass das BD BACTEC Plus Aerobic/F-Medium in Plastikfläschchen ist genauso leistungsstark wie das BD BACTEC Plus Aerobic/F-Medium in Glasfläschchen.10 Die Hefen Candida albicans, C. glabrata, und Cryptococcus neoformans wurden im Rahmen der analytischen Tests dieser Vorrichtung analysiert. LIEFERBARE PRODUKTE Best.- Nr. Beschreibung 442023 BD BACTEC Plus Aerobic/F Medium LITERATUR: S. "References" im englischen Text. Technischer Kundendienst: setzen Sie sich mit Ihrer zuständigen BD-Vertretung oder www.bd.com. 9 B B ACTEC Plus Aerobic/F Culture Vials Brodo digerito di soia-caseina in flacone di plastica Italiano USO PREVISTO Il terreno BD BACTEC Plus Aerobic/F è usato in una procedura qualitativa per la coltura in aerobiosi e l'isolamento di microrganismi (batteri e lieviti) dal sangue. Questo terreno è principalmente usato con gli strumenti BD BACTEC della serie fluorescente. SOMMARIO E SPIEGAZIONE Il campione da testare è inoculato in uno o più flaconi, che vengono inseriti nello strumento BD BACTEC della serie fluorescente per l’incubazione e la lettura periodica. Ogni flacone contiene un sensore chimico in grado di rilevare aumenti nella CO2 prodotta dalla crescita dei microrganismi. Ogni dieci minuti, lo strumento monitora il sensore al fine di rilevare ogni aumento di fluorescenza, che è proporzionale alla quantità di CO2 presente. Una lettura positiva indica la presenza presuntiva di microrganismi vitali nel flacone. La rilevazione si limita ai microrganismi che crescono in un particolare tipo di terreno. L’utilizzo di resine è stato descritto per il trattamento di campioni di sangue prima e dopo l'inoculo nei terreni di coltura. Le resine sono state incorporate nei terreni di coltura BD BACTEC per migliorare l'isolamento di microrganismi senza necessità di trattamenti speciali.1-3 PRINCIPI DELLA PROCEDURA Se nel campione inoculato nel flacone BD BACTEC sono presenti microrganismi, questi metabolizzano i substrati presenti nel flacone, producendo così CO2. Gli aumenti nella fluorescenza del sensore del flacone, causati dalla maggiore quantità di CO2, vengono monitorati dallo strumento BD BACTEC della serie fluorescente. L’analisi delle velocità e dell’entità dell’aumento di CO2 consente allo strumento BD BACTEC della serie fluorescente di determinare se il flacone è positivo, ossia che il campione contiene microrganismi vitali. REAGENTI Prima del trattamento, i flaconi di coltura BD BACTEC contengono i reagenti seguenti: Elenco degli ingredienti BD BACTEC Plus Aerobic/F (442023) Acqua purificata 30 mL peso/vol Brodo digerito di soia-caseina 3,0% Estratto di lievito 0,25% Aminoacidi 0,05% Zucchero 0,2% Sodio polianetolsulfonato (SPS) 0,05% Vitamine 0,025% Antiossidanti/riducenti 0,005% Resina adsorbente anionica 13,4% Resina a scambio cationico 0,9% Tutti i terreni di coltura BD BACTEC sono dispensati con CO2 addizionata. Avvertenze e precauzioni: I flaconi di coltura preparati sono destinati a uso diagnostico in vitro. Questo prodotto contiene gomma naturale secca. I campioni clinici possono contenere microrganismi patogeni, inclusi i virus dell’epatite e dell’immunodeficienza umana. Manipolare tutti i materiali e gli articoli contaminati con sangue in conformità alle linee guida dell’istituto e alle “Precauzioni standard”.4-7 Prima dell’uso, esaminare ogni flacone per escludere evidenze di contaminazione quali torpidità, rigonfiamento o schiacciamento del setto oppure perdite. NON USARE un flacone se presenta evidenza di contaminazione. Un flacone contaminato può avere pressione positiva. In caso di utilizzo di un flacone contaminato per prelievo diretto, il gas o il terreno di coltura contaminato potrebbe rifluire nella vena del paziente. La contaminazione del flacone può non essere immediatamente visibile. In caso di adozione della procedura di prelievo diretto, controllare il processo con estrema attenzione allo scopo di evirare il reflusso dei materiali nel paziente. Prima dell’uso, esaminare i flaconi per escludere evidenza di danni o deterioramento. Non usare flaconi che presentano incrinature o perdite, torbidità, contaminazione, alterazione di colore (assunzione di una colorazione più scura). In rare occasioni, il collo del flacone potrebbe essere incrinato e rompersi durante la rimozione del tappo o la manipolazione. Altrettanto raramente, è inoltre possibile che un flacone non sia stato sigillato in maniera sufficiente. In entrambe le eventualità, possono esservi perdite o fuoriuscite di contenuto, soprattutto in caso di capovolgimento del flacone. Se il flacone è stato inoculato, trattare la perdita o la fuoriuscita con cautela data la potenziale presenza di agenti/microrganismi patogeni. Prima di gettare i flaconi inoculati, sterilizzarli tutti mediante autoclavaggio. Flaconi positivi usati per subcoltura o colorazione, ecc.: prima del campionamento, è necessario lasciare fuoriuscire il gas che spesso di accumula a causa del metabolismo microbico. Se possibile, eseguire il campionamento in camera biologica di sicurezza, indossando indumenti protettivi appropriati, inclusi maschere e guanti. Per ulteriori informazioni sulla procedura di subcoltura, vedere la sezione Procedura. Per ridurre al minimo potenziali fuoriuscite durante l’inoculo dei campioni nei flaconi di coltura, usare siringhe con aghi fissi o punte con raccordo BD Luer-Lok. 10